Combatte al servizio del cognato Antonio della Scala contro il signore di Padova Francesco da Carrara. Lascia Venezia e si indirizza a Mestre dove è raggiunto da Giovanni Ordelaffi e da Gualtiero Borgognone. Attraversa il Piave con 300 lance, 400 balestrieri e 400 fanti;  subisce durante il guado la perdita di  30 fanti per un improvviso attacco del capitano carrarese di Treviso.

Divide l’esercito in più schiere; è assalito nei pressi di Conegliano da 250 lance, da 150 fanti di Serravalle (Vittorio Veneto) e da 30 ungheri capitanati da Ugolino Ghislieri, da Antonio Balestrazzo e da Bartolomeo Boccanera: l’esito è incerto per lungo tempo; alla fine i carraresi rompono le file e si danno al saccheggio. Ostasio da  Polenta può così riordinare i suoi uomini e sconfiggere gli avversari. Nello scontro è ucciso tra i carraresi il fuoriuscito fiorentino Donato Donati; sono catturati Bartolomeo Boccanera e Lorenzo da Pisa con molti fanti e cavalli. Ostasio da Polenta prosegue nel suo cammino. Tocca Sacile. E’ raggiunto nella località da 800 lance che, partite da Marostica, superano il Brenta e tutto il trevigiano senza trovare ostacoli. Vi sono tutte le premesse per una serie di operazioni felici nel Friuli allorché, all’improvviso, viene richiamato a Marostica da Antonio della Scala: è sostituito nel comando delle truppe da Cortesia da Serego.

Fronteggia alle Brentelle, presso Padova, Giovanni degli Ubaldini: con il capitano della fanteria scaligera mette in fuga i fanti carraresi ed i contadini che li affiancano. Le milizie veronesi si disordinano nell’inseguire gli avversari; ciò facilita il contrattacco dell’Ubaldini che termina con la sconfitta di Ostasio da Polenta. Ferito d un colpo di lancia al petto e scavalcato  viene fatto prigioniero con altri condottieri quali Cortesia da Serego, Facino Cane, Ugolino dal Verme e Giovanni Ordelaffi. E’ condotto a Padova.

E’ rilasciato per la sua parentela con i carraresi; si impegna di non riprendere le armi per due mesi e di adoperarsi per la restituzione dei prigionieri padovani.

Con  Giovanni Ordelaffi e Lucio Lando non riesce ad impedire che l’Ubaldini porti soccorso alle torri di Novaglia, di cui egli si è posto all’assedio.

Affronta con Giovanni Ordelaffi nel veronese i carraresi  ora comandati da  Giovanni Acuto. Gli avversari portano le loro devastazioni fino al lago di Garda: Ostasio da Polenta decide di chiudere tutti i passi alle spalle dei carraresi per ostacolare il flusso dei rifornimenti al loro campo. I carraresi si ritirano a Bussolengo dove sono bloccati per venti giorni: sono costretti a mangiare rane e legumi ed a uccidere le cavalcature per potersi sfamare; da Bussolengo le truppe nemiche ripiegano verso il padovano.

Si porta a Castelbaldo: i carraresi sono fermati dalle difese erette di fronte ed alle spalle dai capitani di Antonio della Scala e sembrano ridotti alla fine. Giovanni Acuto dispone di 6900 cavalli, 600 arcieri e 1000 fanti; Ostasio da Polenta e Giovanni Ordelaffi hanno invece ai loro ordini 9900 cavalli, 1000 fanti, 1600 arcieri e balestrieri e 16000 contadini che li affiancano. Ostasio da Polenta, ricoperto nell’occasione, come la sua cavalcatura da una coperta argentata,  ha il comando della seconda schiera, forte di 1500 cavalli. Ne è alla guida con Ugolino dal Verme e Martino Botticella. Cerca di impadronirsi del fossato che divide i due eserciti e trova una grossa resistenza nelle truppe comandate da Francesco Novello da Carrara e da Ugolotto Biancardo. E’ scaraventato a terra da un colpo di lancia di Francesco Novello da  Carrara; soccorso, si rialza; in breve è obbligato a retrocedere con l’Ordelaffi verso il punto in cui si trova Francesco Visconti con la bandiera generale. I provvigionati e gli arcieri inglesi si gettano sugli scaligeri e si impossessano delle insegne. E’ circondato ed è obbligato ad arrendersi nelle mani di Francesco Novello da Carrara. Nella battaglia vi sono 716 morti e 846 feriti; sono catturati 4620 cavalli e 840 fanti. E’ condotto a Padova;  segue Giovanni Acuto e Giovanni degli Ubaldini nel loro ingresso trionfale nella città; la sera con gli altri capitani partecipa ad un pranzo offerto a tutti dal signore di Padova Francesco da Carrara.

Il padre Guido si ammala di peste; allorché questi sembra riaversi dalla malattia con i fratelli Obizzo e Pietro lo cattura e lo incarcera. Guido da Polenta muore in prigione il mese seguente. 

Muore a metà mese. E’ sepolto a Ravenna, con il saio francescano, nella navata sinistra della chiesa di San Francesco (già San Pietro Martire). Cognato di Antonio della Scala.